Osomatsu-kun acompanha o dia a dia caótico dos sextuplos Matsuno: Osomatsu, Karamatsu, Choromatsu, Ichimatsu, Jyushimatsu e Todomatsu. Idênticos na aparência mas diferentes na personalidade, eles vivem aprontando confusões em casa, na escola e pela vizinhança. Com humor absurdo e situações exageradas, o anime mostra suas tentativas desastradas de se destacar, conquistar garotas e lidar com os adultos ao redor. Inspirado no mangá de Fujio Akatsuka, a série mistura comédia física, sátira e personagens excêntricos que entram e saem das histórias, criando esquetes rápidas e imprevisíveis.